色譜柱的流向不能改變色譜柱前后端的填料及填裝工藝都是一樣的,標(biāo)示方向的目的就是讓我們在使用中記住流動(dòng)相從哪個(gè)方向流入色譜柱,那么這個(gè)流入段就是先污染端。這樣就為我們?nèi)蘸缶S護(hù)或再生色譜柱做了準(zhǔn)備,而我們需要遵循這個(gè)規(guī)定應(yīng)該在色譜柱開始做樣后。
色譜柱的說明書定要看清楚色譜柱內(nèi)保存著什么溶劑定要看清楚,因此色譜柱的說明書定要看清楚,當(dāng)然也包括說明書上建議的維護(hù)保養(yǎng)規(guī)定,對我們有用。對于反相柱來說,溶劑基本就是乙腈或甲醇。但正相柱就不同了,因?yàn)檎嘀丝梢赃m用正相系統(tǒng),也可以適用反相系統(tǒng),因此定要看清楚,對于你的方法來說是否需要置換色譜柱內(nèi)保存溶劑。一般色譜柱不能反沖,只有色譜柱使用說明書上標(biāo)明該柱可反沖才可以反沖除去留在柱頭上的雜質(zhì)。否則,反沖色譜柱的影響是迅降柱效。
色譜柱使用完成之后須使用相宜溶劑進(jìn)行清潔處理色譜柱使用完成之后須使用相宜溶劑進(jìn)行清潔處理,例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡;當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動(dòng)相時(shí),使用完后應(yīng)用無鹽流動(dòng)相沖洗;含鹵族 元素(氟、氯、溴)的化合物可能會(huì)腐蝕不銹鋼管道,不宜長期與之接觸;色譜柱如不經(jīng)常使用,應(yīng)每隔4-5天開機(jī)沖洗15分鐘。使用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱對內(nèi)填料的害是大的,尤是純水,除的色譜柱是耐水的。沖洗色譜柱好的方法是用流動(dòng)相比例的水系和有機(jī)系來沖洗。如果你認(rèn)為流動(dòng)相比例無法把色譜柱沖洗干凈或者此比例中有機(jī)系占有比例過大,你可以使用內(nèi)含10%左右的純水來沖洗。
保存在乙腈或甲醇中的新色譜柱可以直接使用,因保存的有機(jī)系具有揮發(fā)性,因此在使用前還是應(yīng)該用小流速的和色譜柱內(nèi)相同的溶劑沖洗一些時(shí)間??梢允?.5ml/min,120min,但建議咨詢廠家,根據(jù)色譜柱參數(shù)設(shè)定。
色譜柱應(yīng)該保存在純乙腈或甲醇中,保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或長時(shí)間。
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